逆转录酶作用过程

时间:2023-08-15 08:11:50 心理 我要投稿

  逆转录酶作用过程,逆转录过程由逆转录酶催化,此酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(complementary DNA, cDNA)。看看逆转录酶作用过程。

  逆转录酶作用过程1

  逆转录酶的作用是

  1、RNA为模板指导的DNA聚合酶活性;

  2、DNA为模板指导的DNA聚合酶活性;

  3、RNaseh活性。

  RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。

  逆转录酶的作用是什么多选

  一般来说不同生物分离出的反转录酶具有不同结构,其中大部分是蛋白质或其亚结构如多肽,有一种比较重要的逆转录酶为端粒酶,是个由RNA和蛋白质组成的核糖核酸(RNA)-蛋白复合物,其RNA组分为模板,蛋白组分具有催化活性,以端粒3'末端为引物,合成端粒重复序列

  逆转录酶的主要作用是

  rna聚合酶是以一条DNA链或RNA为模板,三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶,因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关,所以也称转录酶。rna聚合酶作用于磷酸二酯键。

  rna聚合酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板,二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的`反应表示为:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5’→3',第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后每加入一个核苷酸脱去一个焦磷酸,形成磷酸二酯键,焦磷酸迅速水解的能量驱动聚合反应。与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶无须引物,它能直接在模板上合成RNA链;RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,所以转录时无须将DNA双链完全解开,RNA聚合酶无校对功能。

  RNA聚合酶催化RNA的合成,其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点:①以DNA为模板;②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸;③聚合反应是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯键的反应;④以3’→5’方向阅读模板,5’→3’方向合成核酸;⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。

  逆转录酶有什么用

  逆转录PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR)是一种将RNA转录成cDNA,再进行PCR扩增的技术。以下是逆转录PCR的详细步骤:

  1、RNA提取:从样品中提取RNA,可以使用商业化RNA提取试剂盒或手工提取方法。

  2、逆转录反应:将RNA转录成cDNA,需要使用逆转录酶和引物。逆转录酶可以是M-MLV逆转录酶或AMV逆转录酶等,引物可以是随机引物或特异性引物。逆转录反应的条件包括温度、时间和反应体系等,需要根据实验目的和样品特点进行优化。

  3、PCR扩增:将逆转录反应产生的cDNA作为模板,使用特异性引物进行PCR扩增。PCR扩增的条件包括温度、时间和反应体系等,需要根据引物特点和模板浓度进行优化。

  4、PCR产物分析:可以使用凝胶电泳、实时荧光定量PCR等方法对PCR产物进行分析和检测。

  需要注意的是,逆转录PCR技术需要注意RNA的质量和纯度,避免RNA降解和污染对实验结果的影响。同时,逆转录反应和PCR扩增的条件需要进行优化,以获得高效、特异性和稳定的PCR产物。

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  逆转录酶的作用过程

  6大肠埃希菌DNA复制时,①DNA聚合酶Ⅲ②解链酶③DNA聚合酶Ⅰ④引物酶⑤DNA连接酶⑥拓扑异构酶,酶催化作用的顺序应是 7DNA半保留复制设想的。

  逆转录酶作用过程2

  逆转录酶的作用是什么?

  逆转录PCR或者称反转录PCR,是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。

  其作用:

  1、DNA聚合酶活性,以RNA为模板,催化脱氧核糖核苷三磷酸聚合成DNA的过程。

  2、DNA指导的DNA聚合酶活性,以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以脱氧核糖核苷三磷酸为底物,再合成第二条DNA分子

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  3、具有酶催化消化信使RNA的能力。

  4、逆转录酶:又称为依赖RNA的DNA聚合酶。

  逆转录酶作用于氢键

  解旋酶作用于3-5磷酸二酯键不作用于氢键,氢键是分子间作用力强度较小解旋时便会断开。

  逆转录酶的作用是

  逆转录: 以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,以四种游离脱氧核苷酸为原料合成DNA的过程。

  常见于逆转录病毒(某些RNA病毒)的复制中。举例:艾滋病病毒(HIV)、SARS病毒、禽流感病毒是高中阶段会考到的逆转录病毒、

  逆转录酶具有什么活性

  1、DNA聚合酶一般特指以DNA为指导,消耗dNTP生成DNA的酶。

  在原核生物中主要是Ⅰ和Ⅲ等五种,后者承担主要复制活性,不同亚基有不同功能;前者负责纠错和修复。

  在真核生物中有非常多种DNA聚合酶,其中DNA pol α参与引物链的合成;DNA pol β参与SOS修复;DNA pol γ参与线粒体DNA复制,DNA pol δ和DNA pol ε分别参与后随链和前导链的复制,DNA pol δ还参与DNA损伤的修复。

  2、RNA聚合酶以DNA为指导,消耗NTP生成hnRNA。

  在原核生物中是一个大酶,有六个亚基。其中前五个在一起被叫做核心酶,第六个是σ因子,参与启动子的识别。

  真核生物里RNA pol Ⅰ参与rRNA的合成;Ⅱ是最重要的,合成mRNA和一些sRNA;Ⅲ合成其他的sRNA。

  3、逆转录酶有①依赖RNA的DNA聚合活性②核糖核酸酶H活性(用于水解tRNA引物)③依赖DNA的DNA聚合酶活性。也就是说,逆转录酶也是一种特殊的DNA聚合酶。

  4、RNA复制酶很少提,易错高突变,很少需要引物。

  硬是要说共同点的话、、合成的方向都是3'→5',化学本质都是蛋白质。毕竟第四个连合成场所都不一样,实在不好找共同点。

  什么叫逆转录酶

  逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。

  逆转录过程是病毒的复制形式之一,如RNA病毒中的逆转录病毒,DNA病毒中的拟逆转录病毒的复制均需要经过逆转录。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。

  人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。

  逆转录酶的主要作用是

  1、ATP合成酶:指催化ADP和磷酸,利用能量形成ATP的酶。

  2、 ATP水解酶:指催化ATP水解形成ADP和磷酸,释放能量的酶。

  3、淀粉酶:主要由唾液腺分泌的唾液淀粉酶、胰腺分泌的胰淀粉酶和肠腺分泌的肠淀粉酶,可催化淀粉水解成麦芽糖。

  4、麦芽糖酶:主要有胰腺分泌的胰麦芽糖酶和肠腺分泌的肠麦芽糖酶,可催化麦芽糖水解成葡萄糖。

  5、蛋白酶:主要有胃腺分泌的胃蛋白酶和胰腺分泌的胰蛋白酶,可催化蛋白质水解成多肽和氨基酸。作用结果是破坏肽键和蛋白质的空间结构。

  6、肽酶:由肠腺分泌,可催化多肽链水解成氨基酸。

  7、脂肪酶:主要有胰腺分泌的胰脂肪酶和肠腺分泌的肠脂肪酶,可催化脂肪分解为脂肪酸和甘油。肝脏分泌的胆汁乳化脂肪形成脂肪微粒后,有利于脂肪分解。

  8、转氨酶:催化蛋白质代谢过程中氨基转换过程。如人体的谷丙转氨酶(GPT),能够把谷氨酸上的氨基转移给丙酮酸,从而形成丙氨酸和a—酮戊二酸。由于谷丙转氨酶在肝脏中的含量最多,当肝脏病变时谷丙转氨酶就大量释放到血液,因此临床上常把化验人体血液中这种酶的含量作为诊断是否患肝炎等疾病的一项重要指标。

  9、纤维素酶和果胶酶:植物细胞工程中植物体细胞杂交时,需事先用纤维素酶和果胶酶分解植物细胞的细胞壁,从而获得有活力的原生质体,然后诱导不同植物的原生质体融合。

  10、胰蛋白酶:在动物细胞工程的动物细胞培养中,需要用胰蛋白酶将取自动物胚胎或幼龄动物的器官和组织分散成单个的细胞,然后配制成细胞悬浮液进行培养。或用于细胞传代培养时将细胞从瓶壁上消化下来。

  11、 DNA聚合酶:在DNA复制中起作用,是以一条单链DNA为模板,将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链,形成链与母链构成一个DNA分子。

  12、解旋酶:作用于氢键,是一类解开氢键的酶,由水解ATP来供给能量它们常常依赖于单链的存在,并能识别复制叉的单链结构。在细菌中类似的解旋酶很多,都具有ATP酶的活性。大部分的移动方向是5′3′,但也有3′5′移到的情况,如n′蛋白在φχ174以正链为模板合成复制形的过程中,就是按 3′5′移动。在DNA复制中起作用。

  13、DNA连接酶:其功能是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键。如果将经过同一种内切酶剪切而成的两段DNA比喻为断成两截的梯子,那么,DNA连接酶可以把梯子的“扶手”的断口处(注意:不是连接碱基对,碱基对可以依靠氢键连接),即两条DNA黏性末端之间的缝隙“缝合”起来。据此,可在基因工程中用以连接目的基因和运载体。与DNA聚合酶的.不同在于:不在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键,而是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来,因此DNA连接酶不需要模板

  14、RNA聚合酶:又称RNA复制酶、RNA合成酶,作用是以完整的双链DNA为模板,边解放边转录形成mRNA,转录后DNA仍然保持双链结构。对真核生物而言,RNA聚合酶包括三种:RNA聚合酶I转录rRNA,RNA聚合酶Ⅱ转录mRNA,RNA聚合酶Ⅲ转录tRNA和其她小分子RNA。在 RNA复制和转录中起作用。

  15、逆(反)转录酶:为RNA指导的DNA聚合酶,催化以RNA为模板、以脱氧核糖核苷酸为原料合成DNA的过程。具有三种酶活性,即RNA指导的 DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶。在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。在基因工程中起作用。

  16、限制性核酸内切酶(简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子,特异性地切断DNA链中磷酸二酯键,发现于原核生物体内,现已分离出100多种。例如,从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开。目前已经发现了200多种限制酶,它们的切点各不相同。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因,就能被某种限制酶切割下来。

  逆转录酶作用于哪里

  逆转录病毒,该类病毒首先以自身RNA为模板经逆转录酶的催化,形成RNA—DNA杂交分子,再以单链DNA为模板,合成双链DNA,后者整合到宿主细胞的DNA上,进而合成若干子代单链RNA。如HIV病毒、Rous肉瘤病毒等。逆转录病毒是一类具有包膜的、含ssRNA的球状病毒,呈二十面体对称。病毒粒子的组成十分复杂。以小鼠白血症病毒为例,除含有一些一般病毒所具有的ssRNA、蛋白质、脂肪和糖类外,还含有逆转录酶、核糖核酸酶H、转化蛋白和DNA连接酶等。  病毒粒子通过其包膜表面的糖蛋白刺穿与宿主细胞膜上的特异受体相识别,经膜的融合或吞噬作用而侵入细胞。

  逆转录酶作用于磷酸二酯键

  可以,逆转录酶催化的是以RNA为模板合成DNA的过程,合成DNA就有磷酸二酯键形成。

  逆转录酶作用于什么键

  相同点:成份都是蛋白质,都有催化功能异∶作用各不相同DNA聚合酶作用于DNA的磷酸二酯键,用于DNA的复制过程形成新链用的逆转录酶指导RNA上的遗传信息到DNARNA聚合酶是识别DNA信息模板链上的启动子,催化DNA转录形成信使RNARNA复制酶只特异地对病毒RNA起作用,而宿主细胞RNA一般不进行复制。

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